إجراءات توحيد الغرف المعقمة ومواصفات القبول

1. الغرض: يهدف هذا الإجراء إلى توفير إجراء موحد للعمليات المعقمة وحماية الغرف المعقمة.

2. نطاق التطبيق: مختبر الاختبارات البيولوجية

3. الشخص المسؤول: اختبار مشرف مراقبة الجودة

4. التعريف: لا شيء

5. احتياطات السلامة

إجراء عمليات معقمة بدقة لمنع التلوث الميكروبي؛يجب على المشغلين إيقاف تشغيل مصباح الأشعة فوق البنفسجية قبل دخول الغرفة المعقمة.

6.الإجراءات

6.1.يجب أن تكون الغرفة المعقمة مجهزة بغرفة عمليات معقمة وغرفة عازلة.يجب أن تصل نظافة غرفة العمليات المعقمة إلى درجة 10000. ويجب الحفاظ على درجة الحرارة الداخلية عند 20-24 درجة مئوية ويجب الحفاظ على الرطوبة عند 45-60%.يجب أن تصل نظافة المقعد النظيف إلى الدرجة 100.

6.2.يجب أن تبقى الغرفة المعقمة نظيفة، ويمنع منعا باتا تكديس الحطام لمنع التلوث.

6.3.يمنع بشكل صارم تلوث جميع معدات التعقيم ووسائط الثقافة.ويجب على الأشخاص الملوثين التوقف عن استخدامها.

6.4.يجب أن تكون الغرفة المعقمة مجهزة بمطهرات ذات تركيز فعال، مثل محلول كريسول 5%، وكحول 70%، ومحلول كلورميثيونين 0.1%، وما إلى ذلك.

6.5.يجب تعقيم الغرفة المعقمة وتنظيفها بانتظام بالمطهر المناسب للتأكد من أن نظافة الغرفة المعقمة تلبي المتطلبات.

6.6.يجب تغليف جميع الأدوات والأدوات والأطباق وغيرها من العناصر التي يجب إدخالها إلى غرفة معقمة بإحكام وتعقيمها بالطرق المناسبة.

6.7.قبل دخول الغرفة المعقمة، يجب على الموظفين غسل أيديهم بالصابون أو المطهر، ثم تغيير ملابس العمل الخاصة والأحذية والقبعات والأقنعة والقفازات في الغرفة العازلة (أو مسح أيديهم مرة أخرى باستخدام 70٪ من الإيثانول) قبل دخول الغرفة المعقمة.إجراء العمليات في الغرفة البكتيرية.

6.8.قبل استخدام غرفة معقمة، يجب تشغيل مصباح الأشعة فوق البنفسجية في غرفة معقمة للتشعيع والتعقيم لأكثر من 30 دقيقة، ويجب تشغيل المقعد النظيف لنفخ الهواء في نفس الوقت.بعد اكتمال العملية، يجب تنظيف الغرفة المعقمة في الوقت المناسب ثم تعقيمها بالأشعة فوق البنفسجية لمدة 20 دقيقة.

6.9.قبل الفحص، يجب الحفاظ على العبوة الخارجية لعينة الاختبار سليمة ويجب عدم فتحها لمنع التلوث.قبل الفحص، استخدم كرات قطنية تحتوي على كحول بنسبة 70% لتطهير السطح الخارجي.

6.10.خلال كل عملية، يجب إجراء تحكم سلبي للتحقق من موثوقية العملية المعقمة.

6.11.عند امتصاص السائل البكتيري، يجب عليك استخدام كرة الشفط لامتصاصه.لا تلمس القش مباشرة بفمك.

6.12.يجب تعقيم إبرة التلقيح باللهب قبل وبعد كل استخدام.بعد التبريد، يمكن تلقيح الثقافة.

6.13.يجب نقع القش وأنابيب الاختبار وأطباق بتري وغيرها من الأدوات التي تحتوي على سائل بكتيري في دلو تعقيم يحتوي على 5% من محلول اللايسول للتطهير، ويتم إخراجها وشطفها بعد 24 ساعة.

6.14.في حالة انسكاب سائل بكتيري على طاولة أو أرضية، يجب عليك فورًا صب محلول حمض الكربوليك 5% أو 3% لايسول على المنطقة الملوثة لمدة 30 دقيقة على الأقل قبل معالجته.عندما تكون ملابس العمل والقبعات ملوثة بالسوائل البكتيرية، يجب خلعها على الفور وغسلها بعد التعقيم بالبخار عالي الضغط.

6.15.يجب تطهير جميع العناصر التي تحتوي على بكتيريا حية قبل شطفها تحت الصنبور.يمنع منعا باتا تلويث المجاري.

6.16.وينبغي فحص عدد المستعمرات في غرفة معقمة شهريا.مع فتح المقعد النظيف، خذ عددًا من أطباق بيتري المعقمة بقطر داخلي يبلغ 90 مم، واحقن بشكل معقم حوالي 15 مل من وسط زراعة الآجار المغذي الذي تم إذابته وتبريده إلى حوالي 45 درجة مئوية.بعد التصلب، ضعه رأسًا على عقب عند درجة حرارة 30 إلى 35. احتضنه لمدة 48 ساعة في حاضنة درجة مئوية.بعد إثبات العقم، خذ 3 إلى 5 أطباق وضعها على يسار، وسط، ويمين وضع العمل.بعد فتح الغطاء وتعريضه لمدة 30 دقيقة، ضعه رأسًا على عقب في حاضنة بدرجة حرارة 30 إلى 35 درجة مئوية لمدة 48 ساعة ثم أخرجه.يفحص.يجب ألا يتجاوز متوسط ​​عدد البكتيريا المتنوعة الموجودة على اللوحة في منطقة نظيفة فئة 100 مستعمرة واحدة، ويجب ألا يتجاوز متوسط ​​العدد في غرفة نظيفة فئة 10000 3 مستعمرات.إذا تم تجاوز الحد، فيجب تطهير الغرفة المعقمة جيدًا حتى تستوفي عمليات التفتيش المتكررة المتطلبات.

7. راجع الفصل (طريقة فحص العقم) في "طرق الفحص الصحي للأدوية" و"ممارسات التشغيل القياسية الصينية لفحص الأدوية".

8. قسم التوزيع: قسم إدارة الجودة

التوجيه الفني للغرفة النظيفة:

بعد الحصول على بيئة معقمة ومواد معقمة، يجب أن نحافظ على حالة معقمة حتى نتمكن من دراسة كائن حي دقيق معروف أو الاستفادة من وظائفه.وبخلاف ذلك، يمكن أن تختلط الكائنات الحية الدقيقة المختلفة من الخارج بسهولة. وتسمى ظاهرة اختلاط الكائنات الحية الدقيقة غير ذات الصلة من الخارج بالبكتيريا الملوثة في علم الأحياء المجهرية.يعد منع التلوث تقنية حاسمة في العمل الميكروبيولوجي.التعقيم الكامل من ناحية ومنع التلوث من ناحية أخرى هما جانبان من جوانب تقنية التعقيم.بالإضافة إلى ذلك، يجب علينا منع الكائنات الحية الدقيقة قيد الدراسة، وخاصة الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض أو الكائنات الحية الدقيقة المعدلة وراثيا والتي لا وجود لها في الطبيعة، من الهروب من حاوياتنا التجريبية إلى البيئة الخارجية.لهذه الأغراض، في علم الأحياء الدقيقة، هناك العديد من التدابير.

الغرفة المعقمة عادة ما تكون غرفة صغيرة تم إعدادها خصيصًا في مختبر علم الأحياء الدقيقة.يمكن بناؤها بالألواح والزجاج.يجب ألا تكون المساحة كبيرة جدًا، حوالي 4-5 أمتار مربعة، ويجب أن يكون الارتفاع حوالي 2.5 متر.يجب إنشاء غرفة عازلة خارج الغرفة المعقمة.يجب ألا يواجه باب الغرفة العازلة وباب الغرفة المعقمة نفس الاتجاه لمنع تدفق الهواء من جلب البكتيريا المتنوعة.يجب أن تكون كل من الغرفة المعقمة والغرفة العازلة محكمة الغلق.يجب أن تحتوي معدات التهوية الداخلية على أجهزة تنقية الهواء.يجب أن تكون أرضية وجدران الغرفة المعقمة ناعمة، يصعب إيواء الأوساخ وسهلة التنظيف.يجب أن يكون سطح العمل مستويًا.تم تجهيز كل من الغرفة المعقمة والغرفة العازلة بأضواء فوق بنفسجية.يتم وضع مصابيح الأشعة فوق البنفسجية في غرفة معقمة على بعد متر واحد من سطح العمل.يجب على الموظفين الذين يدخلون الغرفة المعقمة ارتداء الملابس والقبعات المعقمة.

حاليًا، توجد الغرف المعقمة في الغالب في مصانع الأحياء الدقيقة، بينما تستخدم المختبرات العامة مقاعد نظيفة.تتمثل الوظيفة الرئيسية للمقعد النظيف في استخدام جهاز تدفق الهواء الرقائقي لإزالة الغبار الصغير المتنوع بما في ذلك الكائنات الحية الدقيقة الموجودة على سطح العمل.يسمح الجهاز الكهربائي للهواء بالمرور من خلال مرشح hepa ومن ثم الدخول إلى سطح العمل، لذلك يتم الاحتفاظ بسطح العمل دائمًا تحت سيطرة الهواء المعقم المتدفق.علاوة على ذلك، توجد ستارة هوائية عالية السرعة على الجانب القريب من الخارج لمنع دخول الهواء البكتيري الخارجي.

وفي الأماكن ذات الظروف الصعبة، يمكن أيضًا استخدام الصناديق الخشبية المعقمة بدلاً من المقعد النظيف.يتميز الصندوق المعقم بهيكل بسيط وسهل الحركة.يوجد فتحتان في الجزء الأمامي من الصندوق، يتم سدهما بواسطة أبواب الدفع والسحب عندما لا تكون قيد التشغيل.يمكنك تمديد ذراعيك أثناء العملية.الجزء العلوي من الأمام مزود بالزجاج لتسهيل التشغيل الداخلي.يوجد مصباح للأشعة فوق البنفسجية داخل الصندوق، ويمكن إدخال الأدوات والبكتيريا من خلال باب صغير على الجانب.

لا تلعب تقنيات التشغيل المعقمة حاليًا دورًا محوريًا في الأبحاث والتطبيقات الميكروبيولوجية فحسب، بل تُستخدم أيضًا على نطاق واسع في العديد من التقنيات الحيوية.على سبيل المثال، التكنولوجيا المعدلة وراثيا، وتكنولوجيا الأجسام المضادة وحيدة النسيلة، وما إلى ذلك.