إجراءات توحيد معايير الغرف المعقمة ومواصفات القبول

1. الغرض: يهدف هذا الإجراء إلى توفير إجراء موحد للعمليات المعقمة وحماية الغرف المعقمة.

2. نطاق التطبيق: مختبر الاختبارات البيولوجية

3. الشخص المسؤول: مشرف مراقبة الجودة والمختبر

4. التعريف: لا يوجد

5. احتياطات السلامة

يجب إجراء العمليات المعقمة بشكل صارم لمنع التلوث الميكروبي؛ ويجب على المشغلين إيقاف تشغيل مصباح الأشعة فوق البنفسجية قبل دخول الغرفة المعقمة.

6. الإجراءات

٦.١. يجب أن تكون الغرفة المعقمة مجهزة بغرفة عمليات معقمة وغرفة عازلة. يجب أن تصل درجة نظافة غرفة العمليات المعقمة إلى ١٠٠٠٠. يجب الحفاظ على درجة حرارة الغرفة الداخلية بين ٢٠ و٢٤ درجة مئوية، ورطوبة بين ٤٥ و٦٠٪. يجب أن تصل درجة نظافة طاولة العمل النظيفة إلى ١٠٠.

6.2. يجب الحفاظ على نظافة الغرفة المعقمة، ويُمنع منعًا باتًا تكديس الحطام لمنع التلوث.

٦.٣. منع تلوث جميع معدات التعقيم ووسائط الزراعة بشكل صارم. يجب التوقف عن استخدامها في حال تلوثها.

6.4. يجب أن تكون الغرفة المعقمة مجهزة بمطهرات ذات تركيز فعال، مثل محلول كريسول 5%، أو كحول 70%، أو محلول كلورميثيونين 0.1%، وما إلى ذلك.

6.5. يجب تعقيم الغرفة المعقمة وتنظيفها بانتظام باستخدام المطهر المناسب لضمان أن نظافة الغرفة المعقمة تلبي المتطلبات.

6.6. يجب تغليف جميع الأدوات والأجهزة والأطباق والأشياء الأخرى التي يلزم إدخالها إلى الغرفة المعقمة بإحكام وتعقيمها بالطرق المناسبة.

٦.٧. قبل دخول الغرفة المعقمة، يجب على الموظفين غسل أيديهم بالصابون أو المطهر، ثم ارتداء ملابس العمل الخاصة والأحذية والقبعات والأقنعة والقفازات في غرفة العزل (أو مسح أيديهم مرة أخرى بإيثانول بنسبة ٧٠٪) قبل دخول الغرفة المعقمة. يجب إجراء العمليات في غرفة البكتيريا.

٦.٨. قبل استخدام غرفة التعقيم، يجب تشغيل مصباح الأشعة فوق البنفسجية فيها لمدة تزيد عن ٣٠ دقيقة للإشعاع والتعقيم، مع تشغيل طاولة التنظيف لنفخ الهواء في الوقت نفسه. بعد انتهاء العملية، يجب تنظيف الغرفة المعقمة في الوقت المناسب، ثم تعقيمها بالأشعة فوق البنفسجية لمدة ٢٠ دقيقة.

٦.٩. قبل الفحص، يجب الحفاظ على سلامة الغلاف الخارجي لعينة الاختبار وعدم فتحه لمنع التلوث. قبل الفحص، استخدم كرات قطنية مبللة بالكحول بنسبة ٧٠٪ لتطهير السطح الخارجي.

6.10. أثناء كل عملية، يجب إجراء فحص سلبي للتحقق من موثوقية التشغيل المعقم.

٦.١١. عند امتصاص السائل البكتيري، يجب استخدام كرة شفط. لا تلمس الماصة مباشرةً بفمك.

٦.١٢. يجب تعقيم إبرة التلقيح باللهب قبل كل استخدام وبعده. بعد التبريد، يُمكن تلقيح المزرعة.

6.13. يجب نقع القش وأنابيب الاختبار وأطباق بتري والأواني الأخرى التي تحتوي على سائل بكتيري في دلو تعقيم يحتوي على محلول لايسول 5% للتطهير، ثم إخراجها وشطفها بعد 24 ساعة.

٦.١٤. في حال انسكاب سائل بكتيري على الطاولة أو الأرضية، يجب فورًا سكب محلول حمض الكاربوليك ٥٪ أو محلول لايسول ٣٪ على المنطقة الملوثة لمدة ٣٠ دقيقة على الأقل قبل معالجتها. في حال تلوث ملابس العمل والقبعات بسائل بكتيري، يجب خلعها فورًا وغسلها بعد التعقيم بالبخار عالي الضغط.

٦.١٥. يجب تطهير جميع الأدوات التي تحتوي على بكتيريا حية قبل غسلها تحت الصنبور. يُمنع منعًا باتًا تلويث المجاري.

6.16. يجب فحص عدد المستعمرات في الغرفة المعقمة شهريًا. مع فتح الطاولة النظيفة، خذ عددًا من أطباق بتري معقمة بقطر داخلي 90 مم، واحقن بطريقة معقمة حوالي 15 مل من وسط زراعة الأجار المغذي الذي تم صهره وتبريده إلى حوالي 45 درجة مئوية. بعد التصلب، ضعه رأسًا على عقب عند 30 إلى 35 درجة مئوية. احضنه لمدة 48 ساعة في حاضنة درجة حرارتها مئوية. بعد إثبات التعقيم، خذ من 3 إلى 5 أطباق وضعها على اليسار والوسط واليمين من وضع العمل. بعد فتح الغطاء وتعريضها لمدة 30 دقيقة، ضعها رأسًا على عقب في حاضنة درجة حرارتها 30 إلى 35 درجة مئوية لمدة 48 ساعة ثم أخرجها. افحصها. يجب ألا يتجاوز متوسط ​​عدد البكتيريا المتنوعة على الطبق في منطقة نظيفة من الفئة 100 مستعمرة واحدة، ويجب ألا يتجاوز متوسط ​​العدد في غرفة نظيفة من الفئة 10000 ثلاث مستعمرات. في حالة تجاوز الحد الأقصى، يجب تطهير الغرفة المعقمة بشكل كامل حتى يتم إجراء عمليات تفتيش متكررة لتلبية المتطلبات.

7. راجع الفصل (طريقة فحص التعقيم) في "طرق فحص النظافة الدوائية" و"ممارسات التشغيل القياسية الصينية لفحص الأدوية".

8. قسم التوزيع: قسم إدارة الجودة

الإرشادات الفنية للغرفة النظيفة:

بعد الحصول على بيئة معقمة ومواد معقمة، يجب الحفاظ على حالة معقمة لدراسة كائن دقيق معروف أو الاستفادة من وظائفه. وإلا، فقد تختلط الكائنات الدقيقة المختلفة من الخارج بسهولة. تُسمى ظاهرة اختلاط الكائنات الدقيقة غير ذات الصلة من الخارج بالبكتيريا الملوثة في علم الأحياء الدقيقة. يُعد منع التلوث تقنية بالغة الأهمية في العمل الميكروبيولوجي. يُعد التعقيم الكامل من جهة، ومنع التلوث من جهة أخرى، جانبين من تقنية التعقيم. بالإضافة إلى ذلك، يجب منع الكائنات الدقيقة قيد الدراسة، وخاصةً الكائنات الدقيقة المسببة للأمراض أو الكائنات الدقيقة المعدلة وراثيًا غير الموجودة في الطبيعة، من التسرب من حاوياتنا التجريبية إلى البيئة الخارجية. ولهذه الأغراض، توجد في علم الأحياء الدقيقة العديد من التدابير.

الغرفة المعقمة هي عادةً غرفة صغيرة مُجهزة خصيصًا في مختبر علم الأحياء الدقيقة. يمكن بناؤها من الألواح والزجاج. يجب ألا تكون المساحة كبيرة جدًا، حوالي 4-5 أمتار مربعة، ويجب أن يكون الارتفاع حوالي 2.5 متر. يجب إنشاء غرفة عازلة خارج الغرفة المعقمة. يجب ألا يواجه باب الغرفة العازلة وباب الغرفة المعقمة نفس الاتجاه لمنع تدفق الهواء من جلب البكتيريا المتنوعة. يجب أن تكون كل من الغرفة المعقمة والغرفة العازلة محكمة الإغلاق. يجب أن تحتوي معدات التهوية الداخلية على أجهزة لتنقية الهواء. يجب أن تكون أرضية وجدران الغرفة المعقمة ناعمة ويصعب احتواء الأوساخ عليها وسهلة التنظيف. يجب أن يكون سطح العمل مستويًا. تم تجهيز كل من الغرفة المعقمة والغرفة العازلة بمصابيح الأشعة فوق البنفسجية. تقع مصابيح الأشعة فوق البنفسجية في الغرفة المعقمة على بعد متر واحد من سطح العمل. يجب على الموظفين الذين يدخلون الغرفة المعقمة ارتداء ملابس وقبعات معقمة.

حاليًا، تُستخدم غرف التعقيم غالبًا في مصانع الأحياء الدقيقة، بينما تستخدم المختبرات العامة منضدة التعقيم. وتتمثل الوظيفة الرئيسية لمنضدة التعقيم في استخدام جهاز تدفق هواء رقائقي لإزالة مختلف أنواع الغبار الدقيق، بما في ذلك الكائنات الدقيقة، من سطح العمل. يسمح الجهاز الكهربائي للهواء بالمرور عبر فلتر HEPA ثم دخول سطح العمل، مما يضمن تدفق الهواء المعقم باستمرار. علاوة على ذلك، يوجد ستارة هواء عالية السرعة على الجانب القريب من الخارج لمنع دخول الهواء البكتيري الخارجي.

في الأماكن ذات الظروف الصعبة، يمكن استخدام صناديق خشبية معقمة بدلاً من طاولة التنظيف. يتميز الصندوق المعقم بتصميمه البسيط وسهولة تحريكه. يوجد فتحتان في مقدمة الصندوق، تُغلقان بأبواب دفع وسحب عند عدم الاستخدام. يمكنك مد ذراعيك للداخل أثناء التشغيل. الجزء العلوي من الواجهة مزود بزجاج لتسهيل التشغيل الداخلي. يوجد مصباح فوق بنفسجي داخل الصندوق، ويمكن وضع الأدوات والبكتيريا من خلال باب صغير على الجانب.

لا تقتصر أهمية تقنيات التشغيل المعقمة حاليًا على دورها المحوري في الأبحاث والتطبيقات الميكروبيولوجية فحسب، بل تُستخدم أيضًا على نطاق واسع في العديد من التقنيات الحيوية، مثل تقنية التعديل الوراثي، وتقنية الأجسام المضادة وحيدة النسيلة، وغيرها.