أهمية تحديد البكتيريا في الغرف النظيفة

يوجد مصدران رئيسيان للتلوث في الغرف النظيفة: الجسيمات والكائنات الدقيقة، والتي قد تنتج عن عوامل بشرية وبيئية، أو أنشطة مرتبطة بالعملية. ورغم بذل قصارى الجهد، سيظل التلوث يتسرب إلى الغرفة النظيفة. تشمل نواقل التلوث الشائعة: أجسام البشر (الخلايا، الشعر)، والعوامل البيئية كالغبار والدخان والرذاذ، أو المعدات (معدات المختبر، معدات التنظيف)، وتقنيات المسح غير السليمة وأساليب التنظيف غير المناسبة.

يُعدّ الأفراد أكثر ناقلي التلوث شيوعًا. فحتى مع ارتداء الملابس الأكثر صرامة واتباع إجراءات التشغيل الأكثر دقة، يُشكّل المشغلون غير المدربين تدريبًا كافيًا أكبر خطر للتلوث في الغرف النظيفة. ويُعتبر الموظفون الذين لا يلتزمون بإرشادات الغرف النظيفة عامل خطر كبير. فمجرد ارتكاب موظف واحد خطأً أو نسيانه خطوة ما، سيؤدي إلى تلوث الغرفة النظيفة بأكملها. ولا يُمكن للشركة ضمان نظافة الغرفة النظيفة إلا من خلال المراقبة المستمرة والتحديث الدائم للتدريب، مع تحقيق معدل تلوث صفري.

تُعدّ الأدوات والمعدات من المصادر الرئيسية الأخرى للتلوث. فإذا لم يتم مسح العربة أو الآلة بشكل كامل قبل دخولها إلى الغرفة النظيفة، فقد تنقل الكائنات الدقيقة. وغالبًا ما يجهل العمال أن المعدات ذات العجلات تمر فوق أسطح ملوثة أثناء دفعها إلى الغرفة النظيفة. تُفحص الأسطح (بما في ذلك الأرضيات والجدران والمعدات، إلخ) بشكل روتيني للكشف عن الكائنات الحية باستخدام أطباق تلامس مصممة خصيصًا تحتوي على أوساط نمو مثل أجار فول الصويا التريبتيكي (TSA) وأجار سابورو ديكستروز (SDA). يُعدّ TSA وسط نمو مُصممًا للبكتيريا، بينما يُعدّ SDA وسط نمو مُصممًا للعفن والخمائر. عادةً ما يُحضن TSA وSDA في درجات حرارة مختلفة، حيث يُعرّض TSA لدرجات حرارة تتراوح بين 30 و35 درجة مئوية، وهي درجة الحرارة المثلى لنمو معظم أنواع البكتيريا. أما نطاق 20-25 درجة مئوية فهو الأمثل لمعظم أنواع العفن والخمائر.

كان تدفق الهواء في السابق سببًا شائعًا للتلوث، لكن أنظمة التكييف والتهوية الحديثة في غرف الأبحاث النظيفة قضت فعليًا على تلوث الهواء. يُراقب الهواء في غرف الأبحاث النظيفة ويُتحكم فيه بانتظام (يوميًا، أسبوعيًا، ربع سنويًا) لقياس عدد الجسيمات، وعدد الكائنات الحية الدقيقة، ودرجة الحرارة، والرطوبة. تُستخدم مرشحات HEPA للتحكم في عدد الجسيمات في الهواء، وهي قادرة على ترشيح الجسيمات التي يصل حجمها إلى 0.2 ميكرومتر. عادةً ما تُشغل هذه المرشحات باستمرار بمعدل تدفق مُعاير للحفاظ على جودة الهواء في الغرفة. تُحافظ الرطوبة عادةً على مستوى منخفض لمنع تكاثر الكائنات الدقيقة، مثل البكتيريا والعفن، التي تُفضل البيئات الرطبة.

في الواقع، أعلى مستوى وأكثر مصادر التلوث شيوعاً في الغرف النظيفة هو المشغل.

لا تختلف مصادر التلوث وطرق دخوله اختلافًا كبيرًا بين الصناعات، ولكن ثمة اختلافات بينها فيما يتعلق بمستويات التلوث المقبولة وغير المقبولة. فعلى سبيل المثال، لا يحتاج مصنّعو الأقراص القابلة للابتلاع إلى الحفاظ على نفس مستوى النظافة الذي يحتاجه مصنّعو الأدوية القابلة للحقن التي تُدخل مباشرة إلى جسم الإنسان.

تُبدي شركات تصنيع الأدوية تساهلاً أقل تجاه التلوث الميكروبي مقارنةً بشركات تصنيع الإلكترونيات عالية التقنية. فشركات تصنيع أشباه الموصلات، التي تُنتج منتجات مجهرية، لا تقبل أي تلوث جزيئي لضمان سلامة المنتج. ولذلك، تُركز هذه الشركات فقط على تعقيم المنتج المراد زرعه في جسم الإنسان، وعلى سلامة عمل الشريحة أو الهاتف المحمول. وهي أقل اهتماماً بالعفن أو الفطريات أو غيرها من أشكال التلوث الميكروبي في غرف التعقيم. في المقابل، تُولي شركات الأدوية اهتماماً بالغاً بجميع مصادر التلوث، الحية منها والميتة.

تخضع صناعة الأدوية لرقابة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA)، ويجب عليها الالتزام الصارم بممارسات التصنيع الجيدة (GMP) نظرًا لخطورة التلوث فيها. لا يقتصر الأمر على ضمان خلو منتجات شركات الأدوية من البكتيريا، بل يشمل أيضًا توثيق جميع العمليات وتتبعها. على سبيل المثال، يمكن لشركات تصنيع المعدات التقنية شحن أجهزة الكمبيوتر المحمولة أو أجهزة التلفاز بعد اجتيازها التدقيق الداخلي. لكن الأمر ليس بهذه البساطة في صناعة الأدوية، ولذلك من الضروري أن تمتلك الشركات إجراءات تشغيل غرف نظيفة، وأن تستخدمها، وأن توثقها. ونظرًا لاعتبارات التكلفة، تلجأ العديد من الشركات إلى الاستعانة بشركات تنظيف خارجية متخصصة.

ينبغي أن يشمل برنامج اختبار البيئة الشامل في غرف التنظيف الجسيمات المحمولة جواً المرئية وغير المرئية. مع أنه لا يُشترط تحديد جميع الملوثات في هذه البيئات الخاضعة للرقابة بواسطة الكائنات الدقيقة، إلا أنه ينبغي أن يتضمن برنامج التحكم البيئي مستوى مناسباً من تحديد البكتيريا في عينات الاستخلاص. وتتوفر حالياً العديد من طرق تحديد البكتيريا.

تُعدّ صبغة غرام الخطوة الأولى في تحديد البكتيريا، لا سيما في عزل غرف العمليات النظيفة، إذ تُقدّم أدلةً تفسيريةً حول مصدر التلوث الميكروبي. فإذا أظهر عزل البكتيريا وتحديدها وجود مكورات موجبة لصبغة غرام، فقد يكون التلوث بشريًا. أما إذا أظهر وجود عصيات موجبة لصبغة غرام، فقد يكون التلوث ناتجًا عن الغبار أو سلالات مقاومة للمطهرات. وإذا أظهر وجود عصيات سالبة لصبغة غرام، فقد يكون مصدر التلوث الماء أو أي سطح رطب.

يُعدّ تحديد الميكروبات في غرف التعقيم الصيدلانية ضروريًا للغاية لارتباطه بالعديد من جوانب ضمان الجودة، مثل الاختبارات الحيوية في بيئات التصنيع، واختبارات تحديد البكتيريا في المنتجات النهائية، والكشف عن الكائنات الحية غير المُحددة في المنتجات المعقمة والمياه، ومراقبة جودة تقنيات تخزين التخمير في صناعة التكنولوجيا الحيوية، والتحقق من الاختبارات الميكروبية أثناء عملية التحقق. وستصبح طريقة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) لتأكيد قدرة البكتيريا على البقاء في بيئة معينة أكثر شيوعًا. وعندما تتجاوز مستويات التلوث الميكروبي المستوى المحدد، أو عندما تشير نتائج اختبار التعقيم إلى وجود تلوث، يصبح من الضروري التحقق من فعالية عوامل التنظيف والتطهير، وتحديد مصادر التلوث.

هناك طريقتان لمراقبة الأسطح البيئية في غرف الأبحاث النظيفة:

1. ألواح التلامس

تحتوي أطباق الاستنبات الخاصة هذه على وسط نمو معقم، يُحضّر بحيث يكون مستواه أعلى من حافة الطبق. يغطي غطاء طبق التلامس السطح المراد أخذ عينة منه، فتلتصق أي كائنات دقيقة مرئية على السطح بسطح الآجار وتُحضن. تُظهر هذه التقنية عدد الكائنات الدقيقة المرئية على السطح.

2. طريقة المسحة

هذه العينة معقمة ومحفوظة في سائل معقم مناسب. تُوضع المسحة على سطح الاختبار، ويتم تحديد الكائن الحي الدقيق عن طريق إعادة المسحة إلى الوسط. تُستخدم المسحات غالبًا على الأسطح غير المستوية أو في المناطق التي يصعب أخذ عينات منها باستخدام طبق التلامس. يُعد أخذ عينات المسحة اختبارًا نوعيًا في الغالب.