أهمية تحديد البكتيريا في غرف الأبحاث

هناك مصدران رئيسيان للتلوث في غرف الأبحاث: الجزيئات والكائنات الحية الدقيقة، والتي يمكن أن تسببها العوامل البشرية والبيئية، أو الأنشطة ذات الصلة في هذه العملية. على الرغم من بذل أفضل الجهود، سيظل التلوث يتغلغل في غرف الأبحاث. تشمل ناقلات التلوث الشائعة المحددة الأجسام البشرية (الخلايا والشعر)، والعوامل البيئية مثل الغبار والدخان والضباب أو المعدات (معدات المختبرات، معدات التنظيف)، وتقنيات المسح وطرق التنظيف غير السليمة.

الناقل الأكثر شيوعا للتلوث هو الناس. حتى مع الملابس الأكثر صرامة وإجراءات التشغيل الأكثر صرامة، فإن المشغلين المدربين بشكل غير مناسب يمثلون أكبر تهديد للتلوث في غرف الأبحاث. الموظفون الذين لا يتبعون إرشادات غرف الأبحاث يشكلون عامل خطر كبير. طالما أن أحد الموظفين يرتكب خطأً أو ينسى خطوة ما، فسيؤدي ذلك إلى تلويث غرفة الأبحاث بأكملها. لا يمكن للشركة ضمان نظافة غرف الأبحاث إلا من خلال المراقبة المستمرة والتحديث المستمر للتدريب بمعدل تلوث صفر.

المصادر الرئيسية الأخرى للتلوث هي الأدوات والمعدات. إذا تم مسح العربة أو الآلة بشكل خشن قبل دخول غرفة الأبحاث، فقد تجلب الكائنات الحية الدقيقة. في كثير من الأحيان، لا يدرك العمال أن المعدات ذات العجلات تتدحرج على الأسطح الملوثة أثناء دفعها إلى غرفة الأبحاث. يتم اختبار الأسطح (بما في ذلك الأرضيات والجدران والمعدات وما إلى ذلك) بشكل روتيني للحصول على أعداد قابلة للتطبيق باستخدام لوحات اتصال مصممة خصيصًا تحتوي على وسائط نمو مثل Trypticase Soy Agar (TSA) وSabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA هو وسط نمو مصمم للبكتيريا، وSDA هو وسط نمو مصمم للعفن والخمائر. عادةً ما يتم تحضين TSA وSDA في درجات حرارة مختلفة، مع تعريض TSA لدرجات حرارة تتراوح بين 30-35 درجة مئوية، وهي درجة الحرارة المثالية لنمو معظم البكتيريا. يعد نطاق 20-25 درجة مئوية مثاليًا لمعظم أنواع العفن والخميرة.

كان تدفق الهواء في السابق سببًا شائعًا للتلوث، لكن أنظمة التدفئة والتهوية وتكييف الهواء (HVAC) الموجودة في غرف الأبحاث اليوم قضت فعليًا على تلوث الهواء. يتم التحكم في الهواء في غرف الأبحاث ومراقبته بانتظام (على سبيل المثال، يوميًا وأسبوعيًا وربع سنويًا) لمعرفة أعداد الجسيمات والأعداد القابلة للحياة ودرجة الحرارة والرطوبة. تُستخدم مرشحات HEPA للتحكم في عدد الجسيمات في الهواء ولديها القدرة على تصفية الجسيمات حتى 0.2 ميكرومتر. عادةً ما يتم تشغيل هذه المرشحات بشكل مستمر بمعدل تدفق مُعاير للحفاظ على جودة الهواء في الغرفة. عادة ما يتم الاحتفاظ بالرطوبة عند مستوى منخفض لمنع تكاثر الكائنات الحية الدقيقة مثل البكتيريا والعفن التي تفضل البيئات الرطبة.

في الواقع، فإن المصدر الأعلى والأكثر شيوعًا للتلوث في غرف الأبحاث هو المشغل.

لا تختلف مصادر وطرق دخول التلوث بشكل كبير من صناعة إلى أخرى، ولكن هناك اختلافات بين الصناعات من حيث مستويات التلوث المسموح بها وغير المسموح بها. على سبيل المثال، لا يحتاج مصنعو الأقراص القابلة للهضم إلى الحفاظ على نفس مستوى النظافة مثل مصنعي العوامل القابلة للحقن التي يتم إدخالها مباشرة إلى جسم الإنسان.

تتمتع شركات تصنيع الأدوية بقدرة أقل على تحمل التلوث الميكروبي من الشركات المصنعة للإلكترونيات عالية التقنية. لا يمكن لمصنعي أشباه الموصلات الذين ينتجون منتجات مجهرية قبول أي تلوث جسيمي لضمان عمل المنتج. ولذلك فإن هذه الشركات تهتم فقط بعقم المنتج الذي سيتم زرعه في جسم الإنسان ووظيفة الشريحة أو الهاتف المحمول. إنهم أقل قلقًا نسبيًا بشأن العفن أو الفطريات أو غيرها من أشكال التلوث الميكروبي في غرف الأبحاث. ومن ناحية أخرى، تهتم شركات الأدوية بجميع مصادر التلوث الحية والميتة.

يتم تنظيم صناعة الأدوية من قبل إدارة الغذاء والدواء ويجب أن تتبع بصرامة لوائح ممارسات التصنيع الجيدة (GMP) لأن عواقب التلوث في صناعة الأدوية ضارة للغاية. لا يتعين على مصنعي الأدوية التأكد من أن منتجاتهم خالية من البكتيريا فحسب، بل يتعين عليهم أيضًا الحصول على توثيق وتتبع لكل شيء. يمكن لشركة معدات عالية التقنية شحن جهاز كمبيوتر محمول أو تلفزيون طالما أنها اجتازت التدقيق الداخلي. لكن الأمر ليس بهذه البساطة بالنسبة لصناعة الأدوية، ولهذا السبب من الأهمية بمكان أن يكون لدى الشركة إجراءات تشغيل غرف الأبحاث واستخدامها وتوثيقها. نظرًا لاعتبارات التكلفة، تقوم العديد من الشركات بتعيين خدمات تنظيف احترافية خارجية لأداء خدمات التنظيف.

يجب أن يتضمن برنامج الاختبار البيئي الشامل للغرف النظيفة جزيئات مرئية وغير مرئية محمولة بالهواء. على الرغم من عدم وجود شرط بأن يتم تحديد جميع الملوثات في هذه البيئات الخاضعة للرقابة بواسطة الكائنات الحية الدقيقة. يجب أن يشتمل برنامج المراقبة البيئية على مستوى مناسب من التعرف البكتيري على العينات المستخرجة. هناك العديد من طرق تحديد البكتيريا المتاحة حاليا.

الخطوة الأولى في تحديد البكتيريا، خاصة عندما يتعلق الأمر بعزل غرف الأبحاث، هي طريقة صبغة جرام، حيث يمكن أن توفر أدلة تفسيرية لمصدر التلوث الميكروبي. إذا أظهرت عملية العزل والتعرف الميكروبي وجود مكورات إيجابية الجرام، فقد يكون التلوث قد جاء من البشر. إذا أظهرت عملية العزل والتعرف الميكروبي وجود عصيات إيجابية الجرام، فقد يكون التلوث ناتجًا عن الغبار أو سلالات مقاومة للمطهرات. إذا أظهرت عملية العزل والتعرف الميكروبي وجود عصيات سلبية الغرام، فقد يكون مصدر التلوث قد جاء من الماء أو أي سطح مبلل.

يعد تحديد الميكروبات في غرف الأبحاث الصيدلانية ضروريًا للغاية لأنه يرتبط بالعديد من جوانب ضمان الجودة، مثل الاختبارات الحيوية في بيئات التصنيع؛ اختبار تحديد البكتيريا للمنتجات النهائية؛ كائنات غير مسماة في المنتجات المعقمة والمياه؛ مراقبة جودة تكنولوجيا تخزين التخمير في صناعة التكنولوجيا الحيوية؛ والتحقق من الاختبارات الميكروبية أثناء التحقق من الصحة. ستصبح طريقة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) للتأكد من قدرة البكتيريا على البقاء في بيئة معينة شائعة أكثر فأكثر. عندما تتجاوز مستويات التلوث الميكروبي المستوى المحدد أو تشير نتائج اختبار العقم إلى التلوث، فمن الضروري التحقق من فعالية عوامل التنظيف والتطهير والقضاء على تحديد مصادر التلوث.

هناك طريقتان لمراقبة الأسطح البيئية للغرف النظيفة:

1. لوحات الاتصال

تحتوي أطباق الثقافة الخاصة هذه على وسط نمو معقم، والذي تم إعداده ليكون أعلى من حافة الطبق. يغطي غطاء لوحة الاتصال السطح المراد أخذ العينات منه، وأي كائنات دقيقة مرئية على السطح سوف تلتصق بسطح الأجار ويتم احتضانها. يمكن لهذه التقنية إظهار عدد الكائنات الحية الدقيقة المرئية على السطح.

2. طريقة المسحة

هذا معقم ويتم تخزينه في سائل معقم مناسب. يتم تطبيق المسحة على سطح الاختبار ويتم التعرف على الكائنات الحية الدقيقة عن طريق استعادة المسحة في الوسط. تُستخدم المسحات غالبًا على الأسطح غير المستوية أو في المناطق التي يصعب أخذ عينات منها باستخدام لوحة الاتصال. أخذ عينات المسحة هو أكثر من اختبار نوعي.